疫苗开发，残留必检——MDCK细胞残留DNA（qPCR）检测试剂盒

传统的流感疫苗多采用鸡胚来繁殖病毒，这种方法一直沿用至今，虽然该技术非常成熟，但在生产工艺中仍受到许多限制。近几年，随着对流行性和季节性流感疫苗的需求越来越大，人们迫切选择使用低成本、质量高的疫苗，这也使得以细胞培养技术生产流感疫苗成为趋势。MDCK作为流感疫苗研究中最典型的哺乳动物细胞系，对流感病毒具有高度敏感性，基于MDCK的应用在流感及禽流感病毒的监测及疫苗生产研究中的突破，为细胞基质的新型流感疫苗的开发提供了理论和实践支持，成为目前最具前景的流感疫苗生产方法。

MDCK细胞及应用特点

MDCK细胞是Madin和Darby于1958年从Cocker Spaniel 肾脏组织分离培育建立的细胞株，通常该细胞呈上皮样以贴壁方式生长，微载体的发现和使用实现了MDCK细胞悬浮培养，可有效增大细胞培养量和病毒收获量。许多研究表明MDCK细胞系可广泛用于多种病毒的扩增和纯化，尤其是对流感病毒的感染效率高、增殖快，且流感病毒不易变异的优点，被公认为目前最适合流感疫苗生产的细胞系之一。

MDCK应用的安全性考量

MDCK细胞的广泛使用出现的一个重要问题是其安全性。据报道，MDCK细胞对免疫缺陷性动物具有不同程度的致瘤性，并且宿主细胞DNA残留也会有潜在的危险性。尽管在MDCK细胞基质流感疫苗生产过程中，通过超滤、核酸酶处理、层析、β-丙内酯灭活等方法可以去除多数宿主MDCK细胞残留DNA，但疫苗产品中仍有可能残留。对此各国也对宿主细胞DNA残留做了相关规定。

相关法规

MDCK细胞残留DNA（qPCR）检测试剂盒

本试剂盒配套有MDCK DNA定量参考品，可快速准确定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中MDCK残留DNA。试剂盒的检测范围为：300pg/µL~0.003pg/µL，最低检测限为1.5 fg/μL，符合宿主细胞DNA残留量≤10 ng/剂。本试剂盒可与zoty中欧中国生物宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒以及全自动核酸提取仪配套使用。

性能指标

标准品线性：

试剂盒标准品线性范围为300pg/μL-0.003pg/μL，共6个浓度，其线性相关系数应符合R2≥0.980，扩增效率90%≤ Eff（%）≤110%，各浓度检测值CV<15%。

阴性参考品符合率：

NTC值为Undetermined或大于35。

定量限：

重复测定浓度为0.0015pg/µL参考品10次后，变异系数CV≤20%，测量偏差结果应不大于|±20%|。

试剂盒精密度：

重复10次检测30pg/μL和0.3pg/μL两个浓度参考品各10次，CV值<15%。

样品加标回收率检测：

用zoty中欧中国生物“宿主细胞残留DNA（磁珠法）样本前处理试剂盒”对100μL样品进行核酸前处理，之后用MDCK细胞DNA残留（qPCR）检测试剂盒对样品进行检测。

经验证，zoty中欧中国生物MDCK细胞残留DNA（qPCR）检测试剂盒的回收率在70%-130%范围内。

关于zoty中欧中国生物ABOUT JUNYAN

zoty中欧中国生物科技（山西）有限公司成立于2021年，作为独立创新的研发、生产和销售一体型企业，zoty中欧中国专注于为生物医药产业提供符合国际标准的质量安全检测产品和服务。公司位于山西省太原市综改示范区，由海归科学家与业内资深专家领队，建设有 ~3200 平米符合 cGMP 标准和 ISO 13485:2016 体系要求的研发生产基地。

zoty中欧中国生物致力于在CGT药企、抗体药、疫苗等领域提供专业合规的工艺杂质残留、宿主细胞核酸及蛋白残留、含量测定、外源污染物检测等产品和服务。结合医药产业发展需求，公司特色的快速即用型检测开发技术已经覆盖20多种检测试剂盒系列产品，拥有专利类知识产权 10 余项。作为助力您成功的生物安全检测合作伙伴，zoty中欧中国生物始终坚持生物原料中国造，为生物医药安全提供国际品质的产品和专业的技术服务。

zoty中欧中国生物科技（山西）有限公司经专业机构 北京国医械华光认证有限公司 评审专家的严格审核后，顺利通过GB/T 42061-2022 idt ISO13485:2016医疗器械质量管理体系认证，体系覆盖产品设计开发、生产和服务全过程，并且获得认证证书。